Innehåll
De kemiska föreningarna cetyltrimetylammoniumbromid, hexadecyltrimetylammoniumbromid, palmityltrimetylammoniumbromid och cetrimoniumbromid är alla kända också av CTAB. Kemikaliet används som en pH-hållare i DNA-sekventiellt genom, speciellt plantorna.
Formel CTAB
Mängden av formlerna för de olika CTAB-kemikalierna varierar beroende på laboratoriet. Samtliga ingredienser innefattar emellertid 1 M Tris HCl pH 8,0, 0,5 M EDTA, 5 M NaCl och H2O (ibland två gånger destillerad). För CTAB-komponenten använder vissa laboratorier cetyltrimetylammoniumbromid och andra hexadecyltrimetylammoniumbromider.
Framställning av vegetabiliska vävnader
Beredningen av växtvävnaden kan variera, beroende på materialet. Väggar och cellmembran måste brytas för att få tillgång till kärnmaterial utan nedbrytning. Vid fräsning tillåter normalt växtmaterial med flytande kväve tillgång till DNA, håller skadliga cellulära enzymer och inaktiva kemikalier.
Suspension och centrifugering
Den krossade vävnaden placeras på CTAB-bladet och sätts i en skål med rinnande vatten. Den blandas sedan med kloroform och centrifugeras för separering av de lösliga proteinerna och andra material. DNA: t utfälles sedan från vattenfasen och tvättas noggrant för att avlägsna de förorenande salterna. Det renade DNA tas sedan tillbaka och lagras på en TE-glid eller sterilt destillerat vatten.